Takara反轉(zhuǎn)錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara反轉(zhuǎn)錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
試劑盒成分:
5×PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 | 400 μl |
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 | 100 μl |
Oligo dT Primer (50 μM) | 100 μl |
Random 6 mers (100 μM) | 400 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 | 1 ml |
Takara反轉(zhuǎn)錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑。使用具有較強(qiáng)延伸能力的PrimeScript RTase可以在較短時(shí)間內(nèi)高效合成Real Time PCR用cDNA。操作簡(jiǎn)單,適合進(jìn)行高通量分析。進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)時(shí),與SYBR® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) , SYBR Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B) 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 試劑配合使用,能進(jìn)行高性能的基因表達(dá)分析。 本制品提供了SYBR Green分析法和探針分析法各自適合的反應(yīng)體系,可以根據(jù)分析方法選擇體系。
Takara反轉(zhuǎn)錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers兩種反轉(zhuǎn)錄引物,可根據(jù)實(shí)際情況區(qū)別使用。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以O(shè)ligo dT Primer和Random 6 mers同時(shí)使用。只擴(kuò)增一種目的基因時(shí),也可以使用Specific Primer作為反轉(zhuǎn)錄引物。
3. 本制品提供了SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應(yīng)體系,可以根據(jù)分析方法選擇體系。
注意:以下是SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)的區(qū)別
① 用于反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)RT Primer Mix添加量。
② 用于反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí),由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會(huì)縮小曲線范圍,結(jié)果精度降低。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。